Caracterización de fracciones mayoritarias del plasma seminal humano: estudio comparativo entre individuos normospérmicos, azoospérmicos, necrozoospérmicos, oligozoospérmicos y vasectomizados / Caracterization of major human seminal plasma fractions: comparative study with normospermic, azoospermic, necrozoospermic, oligozoospermic and vasectomised donors

El plasma seminal humano (PSH) de individuos normospérmicos y con diferentes patologías fue analizado por cromatografía de afinidad en Concanavalina-A Sepharose. Se obtuvieron dos fracciones mayoritarias, F1 y F2, en proporciones variables y con diferencias en la composición de monosacáridos y aminoácidos de acuerdo con el tipo de patología. Galactosa es el principal miembro, juntamenete con fucosa y proporciones variables de manosa, N-acetilglucosamina y N-acetilgalactosamina. Se encontraron diferencias en la estructura primaria de los glicanos (enlaces N- y O-glicosídicos) presentes en las fracciones de los individuos con diferentes patologías. En F1 todas las cadenas de oligosacáridos son del tipo O-glicosídica correspondiendo a glicoproteínas tipo mucina; en F2 se encontró una relación molar O-/N- es 5,3/1. La fracción de F1 de individuos azoospérmicos y oligozoospérmicos son del tipo O-glicosídico mientras que en vasectomizados la relación molar O-/N- es 1,7/1. En todos los casos, F2 presenta cadenas de oligosacáridos O- y N-glicosídicas en diferentes proporciones, con la excepción del plasma seminal de vasectomizado que pertenece al tipo O-glicosídico. Los resultados obtenidos sugieren que la composición de las fracciones F1 y F2 de donantes con diferentes patologías está caracterizada por diferencias importantes en el contenido de carbohidratos y pépticos

Caracterización de fracciones mayoritarias del plasma seminal humano: estudio comparativo entre individuos normospérmicos, azoospérmicos, necrozoospérmicos, oligozoospérmicos y vasectomizados / Caracterization of major human seminal plasma fractions: comparative study with normospermic, azoospermic, necrozoospermic, oligozoospermic and vasectomised donors

El plasma seminal humano (PSH) de individuos normospérmicos y con diferentes patologías fue analizado por cromatografía de afinidad en Concanavalina-A Sepharose. Se obtuvieron dos fracciones mayoritarias, F1 y F2, en proporciones variables y con diferencias en la composición de monosacáridos y aminoácidos de acuerdo con el tipo de patología. Galactosa es el principal miembro, juntamenete con fucosa y proporciones variables de manosa, N-acetilglucosamina y N-acetilgalactosamina. Se encontraron diferencias en la estructura primaria de los glicanos (enlaces N- y O-glicosídicos) presentes en las fracciones de los individuos con diferentes patologías. En F1 todas las cadenas de oligosacáridos son del tipo O-glicosídica correspondiendo a glicoproteínas tipo mucina; en F2 se encontró una relación molar O-/N- es 5,3/1. La fracción de F1 de individuos azoospérmicos y oligozoospérmicos son del tipo O-glicosídico mientras que en vasectomizados la relación molar O-/N- es 1,7/1. En todos los casos, F2 presenta cadenas de oligosacáridos O- y N-glicosídicas en diferentes proporciones, con la excepción del plasma seminal de vasectomizado que pertenece al tipo O-glicosídico. Los resultados obtenidos sugieren que la composición de las fracciones F1 y F2 de donantes con diferentes patologías está caracterizada por diferencias importantes en el contenido de carbohidratos y pépticos (AU)

El enlace O-glicosídico en glicoproteínas de plasma seminal humano / The linkage O-glycosidic in glycoproteins of human seminal plasma

La composición y estructura de los extremos terminales no reductores portadores de los determinantes antigénicos en las cadenas de oligosacáridos de las glicoproteínas del plasma seminal humano, han permitido deducir que estos componentes son fragmentos producidos por la degradación proteolítica endógena de las mucinas. Dado que las cadenas de hidratos de carbono unidas O-glicosídicamente a la serina y la treonina de la cadena peptídica dan lugar a una reacción de beta-eliminación en condiciones alcalinas suaves, hicimos uso del tratamiento alcalino para demostrar la presencia de enlaces lábiles al álcali en las muestras de plasma seminal humano y algunas fracciones glicoproteicas aisladas a partir del mismo. El análisis de los hidratos de carbono que se liberan durante ell tratamiento han permitido obtener información sobre la composición y estructura de este tipo de unidades de oligosacarídos. Hemos identificado al monosacárido involucrado en el enlace O-glicosídico a serina y treonina y hemos podido caracterizar, a través de la reacción de beta-eliminación en condiciones reductoras y no reductoras, las unidades de monosacáridos del extremo terminal reductor

El enlace O-glicosídico en glicoproteínas de plasma seminal humano / The linkage O-glycosidic in glycoproteins of human seminal plasma

La composición y estructura de los extremos terminales no reductores portadores de los determinantes antigénicos en las cadenas de oligosacáridos de las glicoproteínas del plasma seminal humano, han permitido deducir que estos componentes son fragmentos producidos por la degradación proteolítica endógena de las mucinas. Dado que las cadenas de hidratos de carbono unidas O-glicosídicamente a la serina y la treonina de la cadena peptídica dan lugar a una reacción de beta-eliminación en condiciones alcalinas suaves, hicimos uso del tratamiento alcalino para demostrar la presencia de enlaces lábiles al álcali en las muestras de plasma seminal humano y algunas fracciones glicoproteicas aisladas a partir del mismo. El análisis de los hidratos de carbono que se liberan durante ell tratamiento han permitido obtener información sobre la composición y estructura de este tipo de unidades de oligosacarídos. Hemos identificado al monosacárido involucrado en el enlace O-glicosídico a serina y treonina y hemos podido caracterizar, a través de la reacción de beta-eliminación en condiciones reductoras y no reductoras, las unidades de monosacáridos del extremo terminal reductor (AU)

Autoproteólisis del plasma seminal humano I / Autoproteolysis of the human seminal plasma I

Se midió el curso de la autoproteólisis del plasma seminal humano por determinación de la variación en el contenido de proteínas y la liberación de aminoácidos y péptidos de bajo peso molecular al medio, en muestras incubadas a 37§C, a pH 7,2 y a pH 3,5, y el efecto de la actividad enzimática a pH 7,2 con el agregado de tripsina o pronasa. Los resultados obtenidos han permitido demostrar que la proteólisis, aunque existente, es muy lenta, observándose una disminución del contenido proteico y un aumento de los aminoácidos libres, y que ciertas propiedades del plasma seminal, como la distribución de pesos moleculares aparentes o la antigenicidad, no resultan afectadas por la proteólisis debido, posiblemente, a que dichas propiedades están determinadas por la formación de agregados moleculares

Autoproteólisis del plasma seminal humano II: agregación molecular de los fragmentos proteicos y glicoproteicos / Autoproteolysis of the human semen plasma II: molecular aggregation of proteins and glycoproteins fractions

El plasma seminal humano fue analizado por ultracentrifugación en medios conteniendo detergentes y reactivos caotrópicos y por cromatografía de tamices moleculares sobre Sephadex G-100 y G-15 en condiciones desagregantes diferentes, y se calcularon los porcentajes de aminoácidos hidrofóbicos del mismo. Los resultados obtenidos indican que los fragmentos producidos por la proteólisis endógena de las proteínas y glicoproteínas constituyentes del plasma seminal humano interaccionan a través de mecanismos hidrofóbicos y polares, formando agregados moleculares. Estas propiedades de agregación son las que explican ciertos problemas de la biología de la reproducción largamente discutidos, como son: los diferentes resultados obtenidos por los autores en el análisis del plasma seminal humano por electroforesis, inmunoelectroforesis e inmunodifusión, las propiedades de los "antígenos de recubrimiento", la composición y propiedades del "factor de antifertilidad" de alto peso molecular, etc

Autoproteólisis del plasma seminal humano I / Autoproteolysis of the human seminal plasma I

Se midió el curso de la autoproteólisis del plasma seminal humano por determinación de la variación en el contenido de proteínas y la liberación de aminoácidos y péptidos de bajo peso molecular al medio, en muestras incubadas a 37ºC, a pH 7,2 y a pH 3,5, y el efecto de la actividad enzimática a pH 7,2 con el agregado de tripsina o pronasa. Los resultados obtenidos han permitido demostrar que la proteólisis, aunque existente, es muy lenta, observándose una disminución del contenido proteico y un aumento de los aminoácidos libres, y que ciertas propiedades del plasma seminal, como la distribución de pesos moleculares aparentes o la antigenicidad, no resultan afectadas por la proteólisis debido, posiblemente, a que dichas propiedades están determinadas por la formación de agregados moleculares (AU)

Autoproteólisis del plasma seminal humano II: agregación molecular de los fragmentos proteicos y glicoproteicos / Autoproteolysis of the human semen plasma II: molecular aggregation of proteins and glycoproteins fractions

El plasma seminal humano fue analizado por ultracentrifugación en medios conteniendo detergentes y reactivos caotrópicos y por cromatografía de tamices moleculares sobre Sephadex G-100 y G-15 en condiciones desagregantes diferentes, y se calcularon los porcentajes de aminoácidos hidrofóbicos del mismo. Los resultados obtenidos indican que los fragmentos producidos por la proteólisis endógena de las proteínas y glicoproteínas constituyentes del plasma seminal humano interaccionan a través de mecanismos hidrofóbicos y polares, formando agregados moleculares. Estas propiedades de agregación son las que explican ciertos problemas de la biología de la reproducción largamente discutidos, como son: los diferentes resultados obtenidos por los autores en el análisis del plasma seminal humano por electroforesis, inmunoelectroforesis e inmunodifusión, las propiedades de los "antígenos de recubrimiento", la composición y propiedades del "factor de antifertilidad" de alto peso molecular, etc (AU)